Induction and secretion of elastinolytic and proteolytic activity in cultures of Paracoccidioides brasiliensis

P. brasiliensis parasitizes various human tissues and proteinases exported by this fungus may allow it to metabolize and invade host tissues. The influence of the culture medium on the production of proteinases by P. brasiliensis isolates was studied and the export of these enzymes was followed as a function of culture time. The fungus was grown in neopeptone, BSA, elastin orcollagen medium. The culture medium was assayed for azocollytic, elastinolytic and caseinolytic activity. Proteolytic activity was also analysed by electrophoresis of the culture medium on gelatin and casein substrate gels. P. brasiliensis expressed relatively high levels of azocoll, elastin and casein degrading activity in all types of medium, except in neopeptone medium. Generally, expression of azocollytic activity peaked during the third week of culture and caseinolytic activity during the fourth week of culture. Azocollytic activity was highest at pH 4.0 and caseinolytic activity at pH 8.0. Elastinolytic activity was also highest at pH 8.0. This activity, as well as the others, may provide the fungus with a source of carbon and nitrogen and may alsobe responsible for the invasion of host tissues, such as pulmonary elastic fiber, by P. brasiliensis.

Comparative study of disk diffusion and microdilution methods for evaluation of antifungal activity of natural compounds against medical yeasts Candida spp and Cryptococcus sp / Estudo comparativo entre os métodos de difusão em disco e de microdiluição para avaliação de atividade antifúngica de produtos naturais contra as leveduras de interesse médico Candida spp e Cryptococcus sp

Antifungal activity of natural products has been tested by adapting methods designed for synthetic drugs. Inthis study, two methods for the determination of antifungal activity of natural products, agar diffusionand broth microdilution, the CLSI reference methods for synthetic drugs, are compared and discussed. Themicrodilution method was more sensitive. The minimal inhibitory concentrations (MIC) of crude extracts,fractions and pure substances from different species of the plant families Piperaceae, Rubiaceae, Clusiaceae, Fabaceae and Lauraceae, from the Biota project, were determined. Antifungal activities against Candida albicans, C.krusei, C.parapsilosis and Cryptococcus neoformans were produced by several samples

Atividade antifúngica de produtos naturais foi determinada após algumas adaptações de métodos preconizados para fármacos sintéticos. Neste estudo foram comparados e discutidos os métodos para determinação de atividade antifúngica de produtos naturais por duas metodologias, difusão em ágar e microdiluição em caldo, segundo método preconizado pelo CLSI para fármacos sintéticos. A concentração mínima inibitória foi determinada de extratos brutos, frações e de substâncias puras de diferentes espécies de plantas das famílias Piperaceae, Rubiaceae, Clusiaceae, Fabaceae and Lauraceae do projeto Biota. Vários apresentaram atividade antifúngica para as levedurasCandida albicans, C.krusei, C.parapsilosis and Cryptococcus neoformans.

Interação de Paracoccidioides brasiliensis com células endoteliais / Interaction of Paracoccidioides brasilienses with endothelial cells

A paracoccidioidomicose apresenta um amplo espectro de manifestações clínicas e Paracoccidioides brasiliensis, seu agente etiológico, pode atingir vários tecidos com ênfase ao pulmão. A migração de fungos patogênicos através da camada de células endoteliais é considerada pré-requisito para a invasão de múltiplos órgãos e sua disseminação. No presente estudo verificou-se a adesão de P. brasiliensis às células endoteliais in vitro e se esta adesão poderia representar um mecanismo para a disseminação do fungo. Para tanto, além da técnica convencional de microscopia ótica, uma outra metodologia foi desenvolvida, emblocando os cordões umbilicais em parafina, no intuito de detectar o fungo presente no material (in vivo). Experimento de migração de P. brasiliensis através da monocamada de células endoteliais também foi realizado, e nos poços sem células, a migração de células leveduriformes foi maior em menor período de tempo. Os fungos conseguiram passar através da monocamada, quando comparados com o controle sem as células, mas com redução em torno de 30%. Isso mostra que a monocamada foi parcialmente impediente para o fungo, mas que este foi capaz de migrar através dessas células. Em nossos experimentos com estas células, houve grande dificuldade de se encontrar P. brasiliensis aderido ao tapete celular nos períodos de tempo padronizados. Sugere-se com esses resultados que o fungo atravessa as células endoteliais de uma maneira muito rápida, que não pode ser detectada através do cultivo in vitro. Portanto, P. brasiliensis teria capacidade de atravessar rapidamente as células endoteliais e provavelmente alcançar tecidos mais profundos

Epidemiologia das dermatofitoses em instituições públicas da região de Araraquara - SP / Epidemiology of the dermatophytosis in public institutions of the region of Araraquara city - SP

As dermatofitoses são processos infecciosos de pele, pêlo e unhas muito comuns no mundo inteiro. Com o intuito de avaliar a epidemiologia das infecções causadas por estes fungos em Instituições Públicas de Araraquara, 105 amostras de indivíduos com suspeita clínica de dermatofitose foram examinadas no Laboratório de Micologia da Faculdade de Ciências Farmacêuticas, de agosto a dezembro de 2001 e, destas, 47 foram positivas para dermatófitos. Trichophyton rubrum foi a espécie prevalente (56,9%), seguida por Microsporum canis (17%), T. tonsurans (10,6%), T. mentagrophytes (8,5%) e Epidermophyton floccosum (4,3%). T. rubrum foi mais frequente nas lesões dos interdígitos (81,5%) e M. canis foi o principal envolvido nas lesões do couro cabeludo (58,3%). Portanto, houve predomínio de fungos antropofílicos e zoofílicos, respectivamente, dado este que está de acordo com as estatísticas dos estados brasileiros da região Sudeste e Sul, bem como de outras regiões do mundo em que estes fungos foram os mais frequentes isolados de tinha dos pés e do couro cabeludo. Neste estudo, foi também verificada elevada percentagem de T. tonsurans (41,7%) em tinha do couro cabeludo, dado este inédito na região Sudeste

Microbiota fúngica de um prédio com laboratórios da região de Araraquara - SP / Environment fungi of laboratory buildings in Araraquara - SP region

De setembro de 2000 a janeiro de 2001, foram coletadas amostras de 21 ambientes internos de um prédio com laboratórios didáticos, de pesquisa e de atendimento à comunidade, bem como da área externa, em Araraquara, estado de São Paulo. Foi utilizado aparelho que funciona de acordo com o princípio descrito por Andersen, o MAS-100R (MERCK), de simples estágio, que utiliza placas de Petri de 90mm de diâmetro contendo meio de agar Sabouraud-cloranfenicol. Após cinco dias de incubação à temperatura de 25ºC, as colônias foram contadas, reisoladas e identificadas resultando na descrição de 21 taxa. Clodophialophora spp. foi o fungo mais isolado, tanto em ambientes internos como externos, seguido pelos gêneros Penicillium spp. e Mycelia sterilia. De acordo com resolução nº 9, de janeiro de 2003 da ANVISA, fungos considerados inaceitáveis foram encontrados em nove ambientes internos e um dos ambientes apresentou quantidade de fungos (em unidades formadoras de colônia por meio cúbico - UFC/m3) acima do limite aceitável. Entre os fungos isolados, 16 foram relatados como fungos oportunistas, nove relacionados a doenças de plantas e sete associados a problemas alérgicos

Epidemiologia de candidíase hospitalar: importância da identificação específica / Epidemiology of nosocomial candidiasis: the importance of specific identification

Infecções fúngicas sistêmicas são hoje importante causa de morbidade e mortalidade em pacientes imunossuprimidos ou com outras condições predisponentes. Candida albicans e as não-albicans são importante causa de infecções nosocomiais e vários destes agentes são menos suscetíveis às drogas antifúngicas, principalmente os azólicos, um fato que tem significado no tratamento destes pacientes. O moderno laboratório de micologia tem importante papel no esclarecimento destas infecções, incluindo sua detecção , identificação e a sensibilidade a drogas antifúngicas, bem como a análise epidemiológica. Neste estudo, foi comparada a distribuição de espécies de Candida relacionadas a fungemias e outras fontes, em quatro hospitais do Estado de São Paulo. Das 40 leveduras identificadas, C. albicans, C. parapsilosis e C. tropicalis foram isoladas, respectivamente, em 35 por cento, 50 por cento e 15 por cento, revelando uma tendência de ser maior a freqüência de espécies não-albicans. As fungemias foram causadas por C. parapsilosis (45,4 por cento). C. albicans (36,4 por cento) e C. tropicalis (18,2 por cento), o que revela um aumento de espécies não-albicans em relação a séries históricas. As três diferentes espécies foram incluídas em 6,3 e 4 biótipos diferentes, respectivamente para C.albicans, C.parapsilosis e C.tropicalis. Este estudo enfatiza a importância da avaliação de espécies de Candida especialmente em centros hospitalares com pacientes de risco.

Surgical adhesives

The authors have performed a literature review of surgical adhesives, such as cyanoacrylate, collagen gelatin, and fibrin glue. They have included different types of commercial and non-commercial fibrin sealants and have reported on the different components in these adhesives, such as fibrinogen, cryoprecipitate, bovine thrombin, and thrombin-like fraction of snake venom.

The use of snake venom derived fibrin glue in hysterorrhaphy of ovine caesarean surgery

Fibrin glue has been used on its own or in conjunction with suturing materials to promote hemostasis, reduce adherence, strengthen the wound site, and improve healing. Snake venom derived fibrin glue was evaluated as an alternative to conventional uterine suturing after ovine caesarean surgey. Twenty-eight pregnant ewes of known mating date were used. The animals submitted to conventional caesaream sections showed a better wound healing process. As expected, all the operated animals had retained placenta, compromissing coaptation of wound edges. This had a strong influence in the results observed with the animals in which fibrin glue was used. The animals were divided into four groups GI, GII, GIII, and GIV and sacrificed, respectively, 3, 7, 15, and 30 days after surgery for macro and microscopic examination of the uterus. From each group, six animals underwent surgery using fibrin glue and four animals were submitted to comparative conventional hysterorrhaphy using catgut.

Use of fibrin glue derived from snake venom in testicular biopsy of rams

Sequelae due to testicular biopsy such as hemorrhage, adhesion and fibrosis may be limiting factors to the use of this surgical procedure. Fibrin glue (FG) derived from snake venom was used to minimize these sequelae, as well as to evaluate its healing property in tunica vaginalis and scrotal skin or rams. Applicability of fibrin glue derived from snake venom was tested in different tissues of other animals such as in sciatic nerve and colon of rats and skin of rabbits. In the present study, 30 healthy adult rams were used. They were divided into 3 groups of 10 animals each as follows: G1: fibrin glue group (application of fibrin glue on puncutre sites and skin incisions after bilateral testicular biopsy with a Tru-Cut needle); G2: swab/nylon group (hemostasis by compression with a swab on puncture sites and skin suturing with nylon after biopsy) and G3: control group (the animals were not subjected either to biopsy or to surgery). On the 20th day after biopsy, the presence of adhesion strands between the sites of skin incision and testicle was evaluated by palpation. Adhecion strands were found in three testicles (15 per cent) in G1 and in two testicles (10 per cent) in G2. One hundred days after biopsy, orchiectomy was carried out and the material collected was assessed for subcutaneous (SC) and/or tunica vaginalis adhesions. G3 did not present any abnormality. Groups G1 and G2 presented four testicles each (20 per cent) with adhesion between the tunics and biopsy site. On the other hand, subcutaneous adhesions were found once (5 per cent) in G1 and three times (15 per cent) in G2. Fibrin glue showed to be of easy application, required short postoperative monitoring, presented fast and good-quality healing property and tended to reduce formation of subcutaneous adhesion.